Culture d'algues sur milieu gélosé

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Culture d'algues sur milieu gélosé

Messagede Bernard-J » 27 Juil 2018 18:40

Bonjour,

Dans un bocal contenant de l'eau du lac que je maintenais près d'une fenêtre s'est développé une micro-algue verte (probablement une Tetrasporale) que j'ai voulu isoler et multiplier pour effectuer une ientification moléculaire. Malheureusement, l'algue convoitée n'a pas produit de colonie mais j'ai pensé que cette méthode simplissime pourrait intéresser certains d'entre-vous.

Le milieu nutritif ne contenait que de l'eau du lac, gélifiée avec de l'agar-agar. J'avoue avoir utilisé de l'agar microbiologique et autoclavé ce milieu. Néanmoins, je suis certain que de l'agar-agar alimentaire et un chauffage dans une casserole serait suffisant. En effet, ce milieu très peu nutritif limite drastiquement la croissance des bactéries et champignons et n'a pas besoin d'être complètement stérilisé. Une fois refroidies, les boîtes de Petri sont inoculées avec 0,5-1 ml d'eau provenant de mon bocal et incubées à température ambiante à la lumière pendant au-moins deux semaines.

Voici ce que j'ai obtenu:
BdP-Colonies.jpg
Exif et Meta MicroCartouche BdP-Colonies.jpg (149.83 Kio) Vu 4619 fois

Nous avons obtenu de charmantes colonies de toutes les couleurs,... Les petites colonies de couleur cyan-turquoise sont très probablement des cyanobactéries, micro-bâtonnets insignifiants vus au MO. Les colonies brunes sont des diatomées, les roses, violettes sont des bactéries et il y a comme je l'attendais de nombreuses colonies d'algues vertes.
algue verte filam.jpg
Exif et Meta MicroCartouche algue verte filam.jpg (60.19 Kio) Vu 4616 fois


MO.JPG
Exif et Meta MicroCartouche MO.JPG (155.18 Kio) Vu 4617 fois

Pour l'observation au MO, une partie de colonie est prélevée avec un cure-dent, un scalpel ou une aiguille et mise dans une goutte d'eau placée sur lame. Les organismes sont souvent bien incrustés dans l'agar-agar. Le prélèvement de micro-colonies sous le bino ou avec une simple loupe est évidemment plus confortable.
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Re: Culture d'algues sur milieu gélosé

Messagede André » 28 Juil 2018 10:44

Bonjour Bernard

Ton protocole très accessible me parait tout à fait intéressant.
En ce qui concerne ces algues, je propose :
Pour l'algue filamenteuse avec de nombreux pyrénoides : Mougeotia sauf si elle présente des stries d'accroissement auquel cas il s'agit d' Oedogonium .
Les diatomées pourraient corresponde à Achnanthes cf lanceolata
La colonie grise : Cyanobacterie du genre Chroococcus turgidus
Colonie verte : ?
Pour l'algue filamenteuses ramifiée je m'orienterais vers les Ulothricacées mais il faudrait quelques détails complémentaires : présence de pyrénoides, aspect de de la membrane ....
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Re: Culture d'algues sur milieu gélosé

Messagede Bernard-J » 28 Juil 2018 17:36

Merci André pour ces identifications utiles.
Mougeotia me semble bien correct car je n'ai pas vu de stries de croissance sur cet exemplaire (mais j'avais aussi des Oedogonium dans le bocal original).
De plus, les chloroplastes rétrécissaient à vue d’œil sous la lumière intense du MO :
Mougeotia.jpg
Exif et Meta MicroCartouche Mougeotia.jpg (66.92 Kio) Vu 4535 fois

Je n'avais pas remarqué ce phénomène chez les Oedogonium.
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Re: Culture d'algues sur milieu gélosé

Messagede André » 29 Juil 2018 17:44

Bonjour Bernard

On remarque souvent chez Mougeotia une sorte de twist des chloroplastes soit complet soit par demi chloroplastes lors de l'exposition à la lumière : ce doit être ce phénomène là que l'on observe ici .
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Re: Culture d'algues sur milieu gélosé

Messagede Fredlab » 29 Juil 2018 22:36

Hello

Excellente idée.
Merci pour le partage.
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Re: Culture d'algues sur milieu gélosé

Messagede Bernard-J » 31 Juil 2018 18:05

Oui André, j'ai vu bien des twists ;)
Quand la lumière est faible les chloroplastes se positionnent pour augmenter leur surface d'exposition, mais quand la lumière est trop forte, ils changent d'orientation et/ou se ratatinent.
Oedogonium-twisted chloroplast.jpg
Exif et Meta MicroCartouche Oedogonium-twisted chloroplast.jpg (71.9 Kio) Vu 4396 fois

Edit: ! Ne pas regarder le titre de l'image. Je me suis embrouillé, il s'agit de Mougeotia !

@ Fred
:D :D
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