Larve de Chironome, Chromosomes géants de glande salivaire.

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Larve de Chironome, Chromosomes géants de glande salivaire.

Messagede Bertrand » 18 Oct 2007 12:08

J'ai retrouvé dans mes archives ces photos que j'avais faites le 12/12/2003 et à l'époque envoyées sur la 'Liste Microscopies'.

Pour faire la manip, je me suis inspiré de cette page.

A l'époque, le pharmacien de mon village m'a très obligeament offert un flacon de vert de méthyle en poudre dans lequel il en restait quelques grammes.

Séguy ('LE MICROSCOPE, EMPLOI ET APPLICATIONS', Ed. LECHEVALIER, 1949) m'a inspiré une façon simple (T.1, page C, # 306) de le préparer (dilution aqueuse et acidification au moment de l'emploi).

Le plus difficile a été de trouver des larves de chironome! Un magasin d'articles de pêche a été (à l'époque) la solution.

J'ai donc dilué une pointe de bistouri de vert de méthyle en poudre dans 10 cc d'eau déminéralisée (eau pour fer à repasser).

En sectionant la larve avec un bistouri au niveau de la jonction des troisième et quatrième segments (comptés en partant de la tête), on récupère une petite masse gélatineuse translucide de guère plus d'un mm3; les glandes salivaires.

Je les ai placées sur un porte objet et recouvertes de quelques gouttes d'acide acétique dilué (vinaigre d'alcool pur) pendant 10 minutes.

J'ai ensuite disposé une lamelle par dessus et j'ai écrasé les glandes salivaires entre lame et lamelle.

Les photos sont faites à la TouCam (Philips) avec un objectif x10.

Coloration :

J'ai simplement laissé diffuser sous la lamelle quelques gouttes de la solution aqueuse de vert de méthyle, qui s'est acidifié par le résidu d'acide acétique qui servait de milieu de montage !

CHROMOSOMES_01.jpg
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01 - Séguy 'LE MICROSCOPE, EMPLOI ET APPLICATIONS', Ed. LECHEVALIER, 1949, T.1, page C, # 306.

CHROMOSOMES_02.jpg
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02 - Les chromosomes, sans coloration, Obj. x10.

CHROMOSOMES_03.jpg
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03 - Coloration par le vert de méthyle acétique. Obj. x10.

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04 - Sans coloration, suite et fin.

CHROMOSOMES_05.jpg
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05 - Coloration vert de méthyle acétique, suite et fin.

CHROMOSOMES_06.jpg
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06 - Détail d'un chromosome, obj. x40, coloration par le vert de méthyle acétique.
Amicalement,

Bertrand

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